Mathias mit einem Tee 🌈 Profile picture
Aug 6, 2023 25 tweets 4 min read Read on X
Auch wenn ihr die Antwort nicht wusstet, dieses Thema betrifft sehr viele. Denn Parenteralia wie z.B. Impfungen müssen nicht nur steril, sondern auch pyrogenfrei sein. Doch warum ist das wichtig und was haben Pfeilschwanzkrebse damit zu tun?
Ein Thread 🧵 1/23 ⚠️ CN Tierleid
2) Zunächst zum besseren Verständnis ein paar Begriffserklärungen:
Parenteralia sind sterile pharmazeutische Zubereitungen, die zur Injektion, Infusion oder Implantation bestimmt sind. Wie bereits erwähnt, müssen diese auch frei von Pyrogenen sein.
3) Pyrogene sind “fieber erzeugende” Stoffe, die z.B. bei Injektion auch schon in geringsten Mengen lebensbedrohliches Fieber auslösen können. Zu dieser Gruppe gehören u.a. bakterielle Endotoxine.
4) Endotoxine sind Bestandteile der äußeren Zellmembran von gramnegativen Bakterien, genauer gesagt sogenannte Lipopolysaccharide. Während bei der Sterilisation zwar Bakterien abgetötet werden, bleiben diese Endotoxine in deren Überreste in den meisten Fällen intakt.
5) Würde man daher bei der Herstellung nur auf Sterilität achten, könnte es durch die evtl. noch vorhandenen Endotoxine zu gefährlichen Komplikationen kommen. Daher muss in Parenteralia eben auch die Pyrogenfreiheit sichergestellt werden.
6) Einerseits muss die Einbringung von Endotoxinen in den Produktionsprozess und das Produkt natürlich vermieden werden. Andererseits muss die Pyrogenfreiheit im Endprodukt auch nachweislich belegt werden. Hier kommen nun die Pfeilschwanzkrebse ins Spiel.
Ab jetzt: CN Tierleid
7) 1956 beobachtete man, dass es im Blut dieser Tiere in Anwesenheit von Endotoxinen zu einer Gelbildung kommt. Dabei handelt es sich um eine Art Immunreaktion, wobei durch Amöbozyten (spezielle Blutzellen) ein Gerinnungsfaktor ausgeschüttet wird.
8) Aufbauend auf dieser Reaktion wurde schließlich der sogenannte LAL-Test entwickelt. Die Abkürzung steht für "Limulus-Amöbozyten-Lysat", weil eben bei dem Test das Lysat dieser Blutzellen von Pfeilschwanzkrebsen (Limulus) verwendet wird.
9) Der Gerinnungsfaktor liegt als inaktives Proenzym vor und wird konzentrationsabhängig durch Endotoxine aktiviert. Dadurch kommt es je nach Art des Tests ebenfalls zu einer Gelbildung oder alternativ auch zu einer Farbreaktion, die dann photometrisch gemessen werden kann.
10) Der LAL-Test hat sich ab Ende der 70er Jahre zum Goldstandard für die Bestimmung von Endotoxinen entwickelt und wird auch von Gesundheitsbehörden als kritisches Freigabekriterium für entsprechende Parenteralia verlangt.
11) Bis zur Etablierung des LAL-Tests erfolgte der Pyrogennachweis ausschließlich in Kaninchen (über Messung der Veränderung der Körpertemperatur). Doch auch der LAL-Test ist leider mit Tierleid verbunden, da zur Herstellung des Lysates den Tieren Blut entnommen werden muss.
12) Hunderttausende Pfeilschwanzkrebse werden dazu jährlich eingefangen, ihnen wird ein Teil ihres blauen Blutes abgezapft und danach werden sie wieder frei gelassen. Die Details erspare ich euch an dieser Stelle, aber viele Tiere überleben diese Strapazen leider nicht.
13) Aufgrund des enorm hohen internationalen Bedarfs an Lysat für LAL-Tests, um die Sicherheit von Parenteralia zu garantieren, ist hier eine milliardenschwere Industrie entstanden. Ein Liter des Bluts wird angeblich für rund 15.000€ gehandelt.
14) Es würde allerdings seit einiger Zeit eine tierleidfreie Alternative geben. Der rekombinante Faktor C (rFC) ist ein gentechnisch hergestelltes Protein, das auch im Lysat vorkommt. Hier reagiert rFC ebenfalls mit Endotoxinen und die Reaktion kann auch quantifiziert werden.
15) Eine weitere Möglichkeit stellt der Monozyten-Aktivierungstest (MAT) dar. Diese Testmethode hat zusätzlich den Vorteil, dass im Gegensatz zu LAL und rFC nicht nur Endotoxine, sondern auch andere Pyrogene detektiert werden können.
16) Ein Vorteil der alternativen Prüfmethoden ist auch, dass diese robuster sind. Während tierbasierte Ausgangsstoffe natürlichen, biologischen Schwankungen unterliegen, sind synthetische Materialien deutlich einheitlicher.
17) Das wirft natürlich die Frage auf, warum die tierleidfreien Alternativen noch nicht großflächig zum Einsatz kommen?
Vereinfacht gesagt lässt sich das mit gesundheitsbehördlichen Vorgaben sowie mit finanziellen Gründen erklären. Dazu noch ein paar Hintergründe:
18) Man muss wissen, dass der Pyrogennachweis einer der kritischen Parameter für die Freigabe von entsprechenden Arzneistoffen ist. Die Regularien dazu sind folglich sehr streng und entsprechend vorsichtig ist man mit Änderungen.
19) Der rFC-Test wurde z.B. ab 2016 in den EU-Regularien erwähnt und ist da erst seit 2021 als alternative Prüfmethode beschrieben. Doch dennoch ist der Wechsel nicht so einfach möglich und mit erheblichem Aufwand verbunden.
20) Hersteller müssen wegen der Kritikalität zu Recht nachweisen, dass ein neues Prüfverfahren für ihr Produkt auch geeignet ist. Dazu sind umfassende Validierungen und Genehmigungen durch Gesundheitsbehörden erforderlich.
21) Dazu kommt die fehlende weltweite Harmonisierung der gesundheitsbehördlichen Anforderungen. So können alternative Prüfmethoden z.B. in der EU bereits rechtlich erlaubt sein, in anderen Ländern ist aber der LAL-Test noch diese ohne Alternative vorgeschrieben.
22) Am Ende steht für die Hersteller, so ehrlich muss man sein, natürlich auch die Wirtschaftlichkeit. Aufgrund der oben beschriebenen Umstände ist es für sie finanziell oft ungünstig, die etablierten Test-Systeme zu ändern.
23) Die Aufnahme von tierleidfreien Alternativen in die Regularien zeigt zumindest, dass man auf dem richtigen Weg ist, wenngleich man hier schon deutlich weiter sein könnte.
Bleibt zu hoffen, dass sich die Alternativen durchsetzen, bevor man von der Natur dazu gezwungen wird.
P.S.: 2021 beschloss die Europäische Arzneibuchkommission, dass der oben erwähnte Kaninchentest innerhalb von etwa fünf Jahren aus dem Ph. Eur. gestrichen werden soll. Das wäre ein weiterer wichtiger Schritt, da es auch hier eine Alternative (MAT) gibt.
pharmazeutische-zeitung.de/pyrogentest-ba…
@threadreaderapp unroll

• • •

Missing some Tweet in this thread? You can try to force a refresh
 

Keep Current with Mathias mit einem Tee 🌈

Mathias mit einem Tee 🌈 Profile picture

Stay in touch and get notified when new unrolls are available from this author!

Read all threads

This Thread may be Removed Anytime!

PDF

Twitter may remove this content at anytime! Save it as PDF for later use!

Try unrolling a thread yourself!

how to unroll video
  1. Follow @ThreadReaderApp to mention us!

  2. From a Twitter thread mention us with a keyword "unroll"
@threadreaderapp unroll

Practice here first or read more on our help page!

More from @Malo_82

May 17, 2024
„#Immunschuld-Konto auffüllen mit #Rohmilch“

Ein mikrobiologischer Best-of Thread 🦠🧵1/9 Ein KI generiertes Bild eines Glas Milch. Die Milch ist teilweise grün gefärbt.
2) Salmonellen
Mit den bekanntesten Vertreter Salmonella Typhimurium und Salmonella Enteritidis kannst du versuchen deine Immunschuld nach dem Genuss von Rohmilch mit Übelkeit, Durchfall, Fieber, Erbrechen, Kreislaufbeschwerden und Bauchkrämpfen zu begleichen. Elektronenmikroskopische Aufnahme von Salmonella Typhimurium https://de.wikipedia.org/wiki/Salmonella_Typhimurium#/media/Datei:Salmonella_Typhimurium_invading_a_human_epithelial_cell_-_Scanning_electron_micrograph.jpg
3) Listerien
Infektionen mit diesen Bakterien nach dem Genuss von Immunschuld-Rohmilch ist v.a. für Risikogruppen spannend. Bei Schwangeren z.B. können Listerien Früh- & Fehlgeburten verursachen oder auf das Kind übertragen werden, wo es auch zu Gehirnhautentzündung kommen kann. Mikroskopische Aufnahme von einer Listerien  https://de.wikipedia.org/wiki/Listerien#/media/Datei:Listeria_monocytogenes_PHIL_2287_lores.jpg
Read 10 tweets
Mar 16, 2023
Ein Gen mit dem Namen "Sonic Hedgehog"?
Das ist aber schon etwas nerdy.
Drosophila Community:
Hold my Aufzuchtröhrchen!

Ein Thread mit 🔟 lustigen bis leicht verstörenden aber offiziellen Gen-Namen der Fruchtfliege 🪰 Foto einer Fruchtfliege von...
1⃣ Cheap Date

Fruchtfliegen, bei denen dieses Gen defekt ist, reagieren sehr empfindlich auf Alkohol.
2⃣ Out Cold

Durch Mutationen in diesem Gen verlieren die Fruchtfliegen ihre Koordination, wenn die Temperatur sinkt.
Read 12 tweets
Mar 3, 2023
Bakterien werden von viralen Killer-Maschinen heimgesucht, die aus einem Sci-Fi-Film stammen könnten 🦠 👾 💀
Diese haben das Potenzial, eine Waffe im Kampf gegen multiresistente Keime zu werden.
Ein Thread über Bakteriophagen 🧵 Comic eines E. coli Bakteriums, das von Phagen umgeben ist. Es blickt besorgt in Richtung der Stelle, an der bereits ein Phage angedockt hat. Als Überschrift steht “Bakteriophagen”, wobei das “O” gegen einen Totenkopf ersetzt wurde.
2) Bakteriophagen sind eine Gruppe von Viren, die (wie der Name schon vermuten lässt) auf Bakterien als Wirtszellen spezialisiert sind. Der Name, der so viel bedeutet wie "Bakterienfresser", lässt schon ihr tödliches Potenzial erahnen.
3) Der Aufbau eines typischen Bakteriophagen, wie dem T4 Phagen, könnte eigentlich auch aus einem Sci-Fi-Film stammen. Der Kopf sitzt auf einem dünnen Hals an dessen Ende sich eine Platte mit Spikes und spinnenbeinartigen Schwanzfasern befindet. Schematische Darstellung des Bakteriophagen T4. Der große Kopf ist ikosaedrisch, darunter ein dünner länglicher Hals an dessen Ende Eine Platte sitzt. Von dort gehen 6 dünne, längliche Schwanzfasern weg. An der Unterseite der Platte sitzen spitze, dreieckige Spikes.
Read 21 tweets
Feb 5, 2023
Deinococcus radiodurans 🦠
Der Hulk unter den Bakterien 🧌

Strahlendosen ☢️ von mehreren Tausend Gray?
Kein Problem für den Hulk unter den Bakterien 🧌

#Mikrobiologie for the Win 🧵 1/15
2) Allen ist wohl klar, dass ionisierende Strahlung gefährlich ist ☢️☠️
Doch was genau passiert da auf molekularer Ebene?
Den größten Schaden richtet die Strahlung bei der DNA an.
3) Die DNA ist eine Doppelhelix und besteht aus zwei sich umwindenden Einzelsträngen. Durch die Strahlung können diese Stränge brechen. Besonders kritisch sind dabei Doppelstrangbrüche, wo die DNA in zwei Teile geteilt bzw. ringförmige DNA (z.B. bei Bakterien) linearisiert wird. Schematische Zeichnung eine...
Read 17 tweets
Dec 18, 2022
Das merkwürdige Paarungsverhalten von Saccharomyces cerevisiae🧑‍🔬🍞🍺
Ein Thread 🧵 1/12 Schematische Grafik des Ver...
2) S. cerevisiae, die Mikrobe des Jahres 2022 ist sicher allen ein Begriff. Die meisten von euch haben bestimmt schon einmal Pizza oder Brot damit gebacken. Den spannende Lebenszyklus dieses wichtigen und bedeutenden Mikroorganismus möchte ich euch nun in diesem Thread zeigen.
3) S. cerevisiae gehört zu den einzelligen Pilzen und ist eine Knospungs-Hefe. Sie kann sich über mitotische Zellteilung vermehren. Diese läuft hier asymmetrisch ab, da sich eine kleine Knospe von der Mutterzelle abschnürt. Die beiden Zellen sind genetisch ident. Grafik des Vermehrungszyklu...
Read 12 tweets
Oct 7, 2022
Ribosomen - Eine 3-teilige Thread Serie
Teil 2: Preisgekrönte Struktur

Passend zur Nobelpreis-Woche dreht sich alles um den Aufbau von Ribosomen. Was die beiden Dinge und Antibiotika miteinander zu tun haben, erfahrt ihr im Thread. Eine Ente kommt übrigens auch vor🦆
🧵1/20 Extrem vereinfachte schemat...
2) Um einen ersten Eindruck von der Komplexität dieser molekularbiologischen Maschine zu bekommen, sehen wir uns zu Beginn eine Struktur des Ribosoms von S. cerevisiae an. Ja, mit Bäckerhefe kann man auch geniale Forschung betreiben🧑‍🔬
(Struktur aus DOI: 10.1126/science.1194294) Kristallstruktur eines eyka...
3) Was man auf dem Bild oben bereits erkennt: das Ribosom besteht aus einer großen und kleinen Untereinheit, die man bei eukaryotischen Ribosomen als 60S bzw. 40S bezeichnet. Zusammen bilden sie dann während der Translation das 80S Ribosom (ja 60+40 ist hier 80🤓)
Read 21 tweets

Did Thread Reader help you today?

Support us! We are indie developers!


This site is made by just two indie developers on a laptop doing marketing, support and development! Read more about the story.

Become a Premium Member ($3/month or $30/year) and get exclusive features!

Become Premium

Don't want to be a Premium member but still want to support us?

Make a small donation by buying us coffee ($5) or help with server cost ($10)

Donate via Paypal

Or Donate anonymously using crypto!

Ethereum

0xfe58350B80634f60Fa6Dc149a72b4DFbc17D341E copy

Bitcoin

3ATGMxNzCUFzxpMCHL5sWSt4DVtS8UqXpi copy

Thank you for your support!

Follow Us!

:(