Thread by @nanoprofe

A diferencia de las bacterias, que pueden cultivarse en medios nutritivos artificiales, los virus requieren una célula (eucariótica o procariota) que puedan infectar para ser cultivados y crecer. Luego, los virus pueden cosecharse del medio de cultivo. /1

Los viriones en el medio de cultivo pueden separarse de las células infectadas por centrifugación o por filtración. Los filtros separan cualquier cosa presente en la solución que sea más grande que los viriones; de esta forma, los virus pueden colectarse en el filtrado. /2

Los virus pueden crecerse in vivo (dentro de un organismo vivo, planta o animal) o in vitro (fuera de una célula en un ambiente artificial como un tubo de ensayo, caja de cultivo o placa de agar). /3

Los bacteriófagos pueden crecerse en una capa densa de bacterias creciendo en agar suave al 0.7% en una caja Petri o caja de cultivo horizontal. La concentración baja de agar permite a los bacteriófagos difundirse fácilmente en el medio de cultivo. /4

Para bacteriófagos lísantes, la lisis de la bacteria infectada puede ser detectada fácilmente como una zona clara llamada placa. Conforme los fagos matan más bacterias, más placas se observarán en el cultivo. /5

Los virus de animales requieren células dentro de un huésped o cultivos celulares de dicho huésped. Son importantes para identificación y diagnóstico, producción de vacunas y estudios de ciencia básica. /6

Un sistema in vivo puede ser un embrión en desarrollo en un huevo de ave (por ejemplo, gallina o pavo) o un animal completo. Por ejemplo, la mayoría de las vacunas de influenza para programas de vacunación se producen cultivando los virus en huevos de gallina. /7

El embrión o animal hospedero sirve como una incubadora para la replicación viral. Localización en el embrión o el animal es muy importante. Muchos virus tienen preferencia tisular específica y pueden inocularse específicamente ahí. /8.

Dentro del embrión, los sitios específicos incluyen la cavidad amniótica, la membrana corioalantoica o el saco de la yema. La infección viral puede dañar membranas, produciendo lesiones llamadas pústulas, afectar el desarrollo embrionario o causar su muerte. /9

Por los estudios in vitro, varios tipos de células pueden usarse para crecer los virus. Un cultivo primario celular frescamente puede ser preparado a partir de órganos o tejidos. Las células se extraen de tejidos por remoción mecánica, tripsinizacion o acción de colagenasa. /10

Ya que los requerimientos de dependencia de anclaje, los cultivos celulares requieren un medio de cultivo líquido en un plato Petri o caja de cultivo, de forma que las células tengan una superficie sólida tal como vidrio o plástico para fijarse y crecer. /11

Los cultivos primarios tienen un tiempo de vida media limitado. Cuando las células en un cultivo primario sufren mitosis y se genera una densidad celular apropiada, las células entran en contacto con otras células. El contacto celular detiene la mitosis. /12

Lo anterior se conoce como inhibición por contacto y evita que la densidad de células sea muy alta. Para prevenir la inhibición, las células de cultivos primarios deben transferirse a otro frasco de crecimiento en medio fresco (cultivo celular secundario). /13

Periódicamente, la densidad celular debe ser reducida retirando algunas células y adicionando medio fresco para proveer espacio y nutrientes para continuar el crecimiento celular. /14

En contraste a los cultivos primarios, las líneas celulares continuas (usualmente provenientes de células transformadas o tumores) pueden ser sub-cultivados muchas veces o incluso crecidos de forma indefinida. /15

Las líneas celulares continuas pueden no exhibir dependencia de anclaje (crecerán en suspensión) y puede emplearse para evitar inhibición por contacto, lo que resulta en apilamientos o aglomerados parecidos a un crecimiento tumoral pequeño. /16

Un ejemplo de células inmortales con la línea de células HeLa, la cuál se originó de células tumorales provenientes de una paciente de cáncer, Henrietta Lacks, que falleció de cáncer cérvico-uterino en 1951. Pero ese será tema de otro hilo.